Die gebürtige Athenerin begann 1979 ihr Medizinstudium in Mainz und war danach zunächst als Ärztin an der Neurologischen Klinik und Poliklinik der Universität Freiburg tätig. Von dort wechselte sie an die Psychiatrische Universitätsklinik und schließlich 1992 nach Aachen. Im Sommer 2002 folgte Euphrosyne Gouzoulis-Mayfrank dem Ruf auf eine C3-Professur für experimentelle Psychiatrie in der Klinik für Psychiatrie und Psychotherapie der Universität zu Köln.
Seit dem 1. April 2008 ist sie Ärztliche Direktorin an den Rheinischen Kliniken. Schwerpunkte in der Krankenhausarbeit sind für sie weitere Spezialisierungen der Behandlungsangebote.
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